Im Zusatzpaket „Da Vincis Verschwinden“ wird es sowohl Einzelspieler- als auch Mehrspieler-Inhalte für „Assassin’s Creed: Brotherhood“ geben. Zur Story: Nachdem die Borgia in Rom gefallen sind, wird Leonardo Da Vinci von den Hermetikern entführt. Die Hermetiker sind ein Untergrund-Kult, der die Menschheit transformieren möchte. Ezio wird sich auf eine unerbittliche Reise begeben, um gestohlene Gemälde zurückzuholen und Da Vinci zu finden bevor es zu spät ist. Auf dieser Reise gibt es außerdem zwei neue Karten und zwei neue Gameplay-Features zu entdecken. Die Ergänzung des Mehrspieler-Modus ist bisher die größte Erweiterung des Spiels. Dazu zählen vier neue Charaktere und zwei neue Spiel-Modi. Die neue Mehrspieler-Karte, Alhambra, zeigt die großartige Umgebung von Albaicin, einem Stadtteil der spanischen Stadt Granada. Die Karte bietet mehrstöckige Innen- und Außen-Areale, die perfekt dafür geeignet sind, sich als Jäger zwischen den nichtsahnenden Zielen auf die Lauer zu legen. Die vier neuen Charaktere werden zweifelsfrei bei den „Assassin’s Creed“-Fans sehr gut ankommen. Zu den neuen Charakteren zählen die Dama Rossa, der Ritter, der Marquis and der Paria. Zusätzlich werden die beiden neuen Spiel-Modi, Eskorte und Meucheln, für ein neues Spielerlebnis bei Brotherhood-Spielern sorgen. Im Eskorte-Modus müssen zwei Teams zu je vier Spielern gegeneinander antreten. In jedem Team gibt es einen VIP. Ziel dieses Team-basierten Modus ist es, den VIP des anderen Teams auszuschalten und dabei den eigenen VIP zu beschützen. Im Meucheln-Modus treten sechs bis acht Spieler in einer zehnminütigen Runde im Deathmatch-Stil gegeneinander an. Das DLC „Da Vincis Verschwinden“ für „Assassin’s Creed: Brotherhood“ erscheint für Xbox 360 und PlayStation 3 Anfang März 2011 per PSN und Xbox Live. Der Preis beläuft sich auf 800 Mirosoft Punkte beziehungsweise 9,99 €.